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PAP elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

發(fā)表時(shí)間:2020-05-26 16:42

PAP elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:

1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。

2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。

注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。

QQ圖片20180928170231.jpg

3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 100ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 100ul 的蒸餾水;其余微孔中加入100ul 的待測(cè)樣本。

4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 50ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。

5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。

6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙徹底拍干。

7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。

8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。

9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。


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