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大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA免費(fèi)代測試劑盒操作步驟

發(fā)表時(shí)間:2020-10-27 15:52

大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA免費(fèi)代測試劑盒操作步驟


  實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,試劑不能直接在37℃溶解;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。


  1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50?l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40?l,然后再加待測樣品10?l(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。


  2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。


  3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用


  4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。


  5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50?l,空白孔除外。


  6、顯色:每孔先加入顯色劑A50?l,再加入顯色劑B50?l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.


  7、終止:每孔加終止液50ml,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。


  8、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。


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