本試劑盒可以檢測從新鮮組織及FFPE組織中提取的DNA,DAN質量及濃度影響檢測的特異性和靈敏度。DNA的質量和樣本保存時間、樣本組成、DNA提取方法密切相關;而且所采集的臨床樣本中正常組織細胞的混雜程度也不同,因此對樣本做如下要求:
一、新鮮標本中的制備過程中,術后標本取下后應立即放入-20度以下的冰箱中保存;石蠟包埋組織制備過程中,術后標本應要在1小時內放入10%中性緩福爾馬林溶液中固定,用量應為組織塊的4-20倍,固定時間在6-48小時之間。
二、新鮮組織樣本,要確保含有腫瘤細胞大于1%,盡量減少正常組織、間質及壞死組織,提取的DNA用分光光度計檢測DNA純度,A260/A280在1.6-2.0之間,如果不能立即檢測請置于-20度保存。
三、FFPE組織樣本,要確保含有腫瘤細胞,盡量去除壞事組織及石蠟邊緣,提取的DNA用的DNA用分光光度計檢測DNA純度,A260/A280在1.6-2.0之間,如果不能立即檢測請置于-20度冰箱保存。FFPE組織樣本保存年限不能超3年。
四、樣本切片規(guī)格要求為:橫切面面積至少6MM*6MM,厚度10uM,3片,如果切片面積小適當增加切片數(shù)。最終提取的DNA用100uL-200uL水溶解,分光光度計檢測濃度后,稀釋或濃縮成5-10ng/uL。