產(chÇŽn)å“介紹
ç´°(xì)胞å稱:人外周血淋巴細(xì)胞系
形態(tà i)特性:淋巴æ¯ç´°(xì)胞樣
生長特性:懸浮生長
特å¾ç‰¹æ€§ï¼šè©²ç´°(xì)胞是由Ritts RE J從一å81æ²ç™½äººç”·æ€§æ¼¿ç´°(xì)胞瘤患者外周血分離并建立。該細(xì)èƒžèƒ½å¤ è¡¨é”(dá)å…ç–«çƒè›‹ç™½ï¼Œä½†æ²’有分泌能力,細(xì)胞表é¢ä¹Ÿæœªæª¢æ¸¬å‡ºå…ç–«çƒè›‹ç™½ã€‚
培養(yÇŽng)æ¢ä»¶ï¼š IMDM:
Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法: 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情æ³ï¼š C7
å‡å˜æ¢ä»¶ï¼šåŸºç¤Ž(chÇ”)培養(yÇŽng)基+5%DMSO+20%FBS 
產(chÇŽn)å“å稱 | 人外周血淋巴細(xì)胞系 |
英文簡稱 | MC/CAR |
狀態(tà i) | è²¼å£ |
ç´°(xì)胞冷å‡ä¿å˜ï¼š
1.å‡å˜æ¶²ï¼š92%完全培養(yÇŽng)基+8%DMSO(å¯ä»¥æ ¹æ“š(jù)實驗室æ¢ä»¶è‡ªè¡Œé¸æ“‡ï¼‰
2.é™æº«æ¥é©Ÿï¼š4度10min,-20度2h,-80éŽå¤œåŽæ¶²æ°®ä¿å˜ã€‚
ç´°(xì)胞培養(yÇŽng)çš„æ“作æ¥é©Ÿï¼š
1.人外周血淋巴細(xì)胞系å¸èµ°ç”¨äºŽåŸ¹é¤Š(yÇŽng)åŸºï¼ŒåŠ å…¥3-5mL PBSåŽè¼•è¼•æ™ƒå‹•åŸ¹é¤Š(yÇŽng)瓶潤洗細(xì)胞;
2.å¸å¹²å‡ˆPBSåŽåŠ å…¥1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕æ–晃培養(yÇŽng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表é¢ï¼ŒåŸ¹é¤Š(yÇŽng)瓶放37度培養(yÇŽng)箱消化;
(細(xì)胞å°äºŽæ¶ˆåŒ–比較æ•æ„Ÿï¼Œæ¶ˆåŒ–éŽåº¦æœƒåš´(yán)é‡å½±éŸ¿ç´°(xì)胞狀態(tà i),導(dÇŽo)致細(xì)胞傳代æ»äº¡æ¼‚浮或者傳代åŽä¸é•·ã€‚ç´°(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫è½ï¼Œå¯ä»¥è¼•è¼•å¹ä¸‹æ™‚å³å¯çµ‚æ¢ï¼Œç¦æ¢æ¶ˆåŒ–到細(xì)胞完全漂浮?ï¼›é¹èš£?xì)胞時盡é‡è¼•æŸ”,ä¸è¦å¹å‡ºå¤§é‡æ°£æ³¡ã€‚)
3.åŠ å…¥6-8ml完全培養(yÇŽng)基終æ¢æ¶ˆåŒ–,輕輕å¹ä¸‹ç´°(xì)胞混勻;
4.將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,å†ç”¨æ–°é®®åŸ¹é¤Š(yÇŽng)基é‡æ‡¸37度培養(yÇŽng)箱繼續(xù)培養(yÇŽng)ï¼›
傳代比例: ä¸åŒç´°(xì)胞生長速度ä¸ä¸€ï¼Œå…·é«”傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,大部分細(xì)胞é©ç”¨1:3-1:4傳代,生長較慢的細(xì)胞å¯ä»¥1:2傳代。