產(chÇŽn)å“介紹
細胞å稱:人肺退行性癌細胞
形態(tà i)特性:上皮細胞
生長特性:貼å£ç”Ÿé•·
特å¾ç‰¹æ€§ï¼š 1976年分離得到。
培養(yÇŽng)æ¢ä»¶ï¼š MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yÅu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法:消化20分é˜ã€‚1:
2。5-6天長滿。
傳代情æ³ï¼š P(32+5)
å‡å˜æ¢ä»¶ï¼šå®Œå…¨åŸ¹é¤Š(yÇŽng)基+8%DMSO
產(chÇŽn)å“å稱 | 人肺退行性癌細胞 |
英文簡稱 | Calu-6 |
狀態(tà i) | è²¼å£ |
細胞冷å‡ä¿å˜ï¼š
1.å‡å˜æ¶²ï¼š92%完全培養(yÇŽng)基+8%DMSO(å¯ä»¥æ ¹æ“š(jù)實驗室æ¢ä»¶è‡ªè¡Œé¸æ“‡ï¼‰
2.é™æº«æ¥é©Ÿï¼š4度10min,-20度2h,-80éŽå¤œåŽæ¶²æ°®ä¿å˜ã€‚
細胞培養(yÇŽng)çš„æ“作æ¥é©Ÿï¼š
1.人肺退行性癌細胞å¸èµ°ç”¨äºŽåŸ¹é¤Š(yÇŽng)åŸºï¼ŒåŠ å…¥3-5mL PBSåŽè¼•è¼•æ™ƒå‹•åŸ¹é¤Š(yÇŽng)瓶潤洗細胞;
2.å¸å¹²å‡ˆPBSåŽåŠ å…¥1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕æ–晃培養(yÇŽng)皿使胰酶浸沒細胞表é¢ï¼ŒåŸ¹é¤Š(yÇŽng)瓶放37度培養(yÇŽng)箱消化;
(細胞å°äºŽæ¶ˆåŒ–比較æ•æ„Ÿï¼Œæ¶ˆåŒ–éŽåº¦æœƒåš´(yán)é‡å½±éŸ¿ç´°èƒžç‹€æ…‹(tà i),導(dÇŽo)致細胞傳代æ»äº¡æ¼‚浮或者傳代åŽä¸é•·ã€‚細胞消化到細胞間隙變大但未脫è½ï¼Œå¯ä»¥è¼•è¼•å¹ä¸‹æ™‚å³å¯çµ‚æ¢ï¼Œç¦æ¢æ¶ˆåŒ–到細胞完全漂浮。混勻細胞時盡é‡è¼•æŸ”,ä¸è¦å¹å‡ºå¤§é‡æ°£æ³¡ã€‚)
3.åŠ å…¥6-8ml完全培養(yÇŽng)基終æ¢æ¶ˆåŒ–,輕輕å¹ä¸‹ç´°èƒžæ··å‹»ï¼›
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,å†ç”¨æ–°é®®åŸ¹é¤Š(yÇŽng)基é‡æ‡¸37度培養(yÇŽng)箱繼續(xù)培養(yÇŽng)ï¼›
傳代比例: ä¸åŒç´°èƒžç”Ÿé•·é€Ÿåº¦ä¸ä¸€ï¼Œå…·é«”傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞é©ç”¨1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞å¯ä»¥1:2傳代。