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產(chǎn)品分類
植物基因組DNA快速提取試劑盒 
植物基因組DNA快速提取試劑盒
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英文名稱 : 植物基因組DNA快速提取試劑盒
貨號(hào) : EY01P1016
規(guī)格 : 50次/100次
品牌 : 上海一研
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包裝與品牌:

產(chǎn)品名稱規(guī)格品牌
植物基因組DNA快速提取試劑盒50次/100次     一研


產(chǎn)品介紹:             


產(chǎn)品說明

本產(chǎn)品可用于擬南芥、煙草、水稻等植物樣本的基因純化。純化原理是利用硅膠膜柱可逆吸附體系中的DNA,經(jīng)漂洗液清洗除去蛋白質(zhì)、脂質(zhì)以及多純化液洗脫獲得基因組DNA。一次可從不超過100材料中提取到2-20μg的高純度基因組(OD260/OD280=1.7-1.9),此基因組DNA可直接酶切等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

質(zhì)量控制

純化的基因組DNA質(zhì)量通過限制性酶切和單拷

保存條件

RNase保存于-20℃。其他的室溫保存

注意事項(xiàng)

●漂洗液PE**次使用前請(qǐng)按瓶上標(biāo)簽加入3倍體積的無水乙醇,即15ml漂洗液PE加入45ml無水乙醇,30ml漂洗液PE加入90ml無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。

●緩沖液GPL室溫保存可能會(huì)有沉淀產(chǎn)生,在56℃加熱溶解,待恢復(fù)室溫后混勻即可使用。不會(huì)影響基因組DNA純化效率。

●應(yīng)盡量使用新鮮的實(shí)驗(yàn)材料,確保提取的基因組DNA不被降解。不能立刻提取基因組DNA的實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡快置于液氮或-70℃

冰箱中保存并避免反復(fù)凍融。

●使用液氮研磨組織材料時(shí),應(yīng)隨時(shí)加入液氮,確保提取的基因組DNA不被降解。

●基因組DNA需長期保存時(shí),建議使用純化液TE。用無菌的離心管分裝后保存于-20℃或-80℃。

●所有離心步驟均為室溫下進(jìn)行。

●請(qǐng)嚴(yán)格按照操作步驟操作。

操作步驟

1 取植物新鮮組織約100mg或干重組織約30mg,加入液氮充分研磨。

2 將研磨好的粉末迅速轉(zhuǎn)移到預(yù)先裝有700μl65℃預(yù)熱緩沖液GPL的離心管中(實(shí)驗(yàn)前在預(yù)熱的GPL中加入巰基乙醇,使其終濃度為0.1%),加入1μlRNase,迅速顛倒混勻后,將離心管放在65℃水浴20min,水浴過程中顛倒離心管以混勻樣品。

3 加入700μl氯仿,充分混勻,12,000rpm(~13,400×g)離心5min。

●如果是提取富含多酚或淀粉的植物組織,可在第3步前,用酚:氯仿/1:1進(jìn)行等體積抽提。

4 小心將上一步所得上層水相轉(zhuǎn)入一個(gè)新的離心管中,加入等體積緩沖液GPD,充分混勻。

5 將混勻的液體轉(zhuǎn)入純化柱,靜置1min,12,000rpm離心30sec,棄濾液。(吸附柱容積為700μl左右,可分次加入離心。)

6 向純化柱中加入500μl去蛋白液PS。12,000rpm離心30sec,棄濾液。

7 向純化柱中加入500μl漂洗液PE。12,000rpm離心30sec,棄濾液。

8 重復(fù)步驟7,向純化柱中加入500μl漂洗液PE。12,000rpm離心30sec,棄濾液。

9 離心純化柱,12,000rpm離心2min,以徹底去除純化柱中殘留的液體。

●此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免影響后續(xù)的酶促反應(yīng)(PCR或酶切)。同時(shí)利于基因組DNA充分溶解。

10 將純化柱置于新的1.5ml離心管中。向純化柱中央處,懸空滴加40-100μl純化液TE。室溫放置2min。12,000rpm離心2min,管底即為高純度基因組DNA。-20℃保存。

●純化液TE可用去離子水代替,但其pH需為8.0-8.5。

●對(duì)純化液TE60℃預(yù)熱,會(huì)提高基因組DNA的產(chǎn)量。

注意事項(xiàng):

  ● RNA樣本保存液如出現(xiàn)沉淀,37℃加熱振蕩混勻。

  ● 加入RNA樣本保存液后,樣本不能立即置于-20℃或-80℃,要先4℃置放過夜,待組織充分浸潤后再置于低溫保存。

  ● 樣品浸沒在RNA樣本保存液中,可在37℃保存1天,25℃保存1周,4℃保存1個(gè)月,-20℃長期保存;使用時(shí)請(qǐng)注意保存時(shí)限。

  ● 保存在RNA樣本保存液中的樣本可不經(jīng)特殊處理,離心或直接使用和新鮮組織一樣的RNA提取方法提取RNA。

  ● RNA樣本保存液可以配合各種常見的RNA提取試劑盒使用,如東盛、invitrogen、omega等公司出品的RNA提取試劑盒,不影響試劑盒操作,不影響提取所得RNA質(zhì)量及其后續(xù)實(shí)驗(yàn)。



買家數(shù)量成交時(shí)間
正品保障

確保所有產(chǎn)品都是原裝正品

優(yōu)質(zhì)服務(wù)

優(yōu)質(zhì)服務(wù),售后無憂

安全包裝

統(tǒng)一包裝,保障產(chǎn)品安全運(yùn)輸

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